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液相色譜柱正確使用方法
  • 發布日期:2016-07-11     信息來源:      瀏覽次數:2676
    • 一、樣品方面
      1.除去微粒及雜質
      2.了解樣品在流動相中的溶解度
      如溶樣品的溶劑不是流動相,一定要用流動相試溶解度,防止其在流動相中析出
      3.了解樣品與色譜柱的基質/填料是否有相互作用
      二、流動相方面
      1.除去微粒
      純度的要求:超純水,梯度實驗時水中有機雜質含量要低;緩沖液的PH值,在填料的允許范圍內;緩沖液(鹽)的濃度;有機溶劑:色譜純,雜質含量盡量低,并與填料相匹配
      2.流動相對樣品的溶解度
      有機溶劑或水的比例
      三、色譜柱的清洗
      對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力zui強的流動相清洗
      硅膠柱的一般方法是先用甲醇洗去極性雜質,然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
      鍵合相柱(烷基)的一般方法是用20倍體積的甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗
      (記住:每種色譜柱可能性有特定的方法,一定要先看其使用說明!)
      四、色譜柱的存放
      存放前的處理要除去雜質、緩沖鹽
      合適的存放溶劑
      避免色譜柱床的干涸
      避免機械震動
      防止細菌生長
      注意存放的溫度
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